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ELISA不常见样本的处理方法—唾液样本

人阅读 发布时间:2020-09-23 09:03

ELISA(酶联免疫吸附剂测定)是一种快速、灵敏、准确可靠的一种定量分析方法,样本的处理对于ELISA实验的成功有着举足轻重的作用。 利用ELISA进行检测的样本类型包括常见的血液(血清、血浆),组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水、前列腺液、精液、阴道分泌物等,这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面就不常见ELISA唾液样本处理方法的整理,希望对您有所帮助。


方法一:
唾液一般饭后半小时内不易采集,因为刚进食的唾液中富含丰富的唾液淀粉酶,采集的时间时空腹采集。


将样品收集于离心管后在-70 度冰冻 1 小时。 在冰上融化样品后, 2000×g 离心 10 分钟,取上清检测。


处理样本的过程就是收集目标蛋白的过程,由于蛋白容易变性,降解,故该过程应尽量温和。样本处理之后的储存也非常重要,尤其注意不要反复冻融,样本处理之后可分装密封保存,4 度保存应小于 1 周,-20 度不应超过 1 个月,-80 度不应超过 2 个月。在标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。样本的处理是实验成功的第一步, 以上就是关于 Elisa 特殊样本处理方法的简述,供研究者参考。

方法二
在唾液样本采集之前,受试者被建议不要吃东西、抽烟或喝饮料。用盐水彻底漱口后,采集唾液
3 mL。立即以4000 rpm的速度离心15分钟,以除去任何颗粒或沉积物。将上清液分装并在70°C下储存备用。


参考文献:
Aydin, S., I. Halifeoglu, I. H. Ozercan, F. Erman, N. Kilic, S. Aydin, N. Ilhan, N. Ilhan, Y. Ozkan, N. Akpolat, L. Sert and E. Caylak (Aydin, Halifeoglu et al.). "A comparison of leptin and ghrelin levels in plasma and saliva of young healthy subjects." Peptides 26(4): 647-652.


 

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