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ELISA不常见样本的处理方法—肺泡灌洗液

人阅读 发布时间:2020-08-25 22:22

ELISA(酶联免疫吸附剂测定)是一种快速、灵敏、准确可靠的一种定量分析方法,样本的处理对于ELISA实验的成功有着举足轻重的作用。 利用ELISA进行检测的样本类型包括常见的血液(血清、血浆),组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水、前列腺液、精液、阴道分泌物等,这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面就不常见ELISA肺泡灌洗液、脑脊液样本处理方法的整理,希望对您有所帮助。
 

 

方法一
在纤支镜下,按常规方法行支气管肺泡灌洗。每次注入无菌生理盐水
20 ml,然后缓慢洗出,每例注入总量约200 ml,其回收率50-60%。回收肺泡灌洗液,1000 rpm离心10分钟,取上清分装-80°C冻存备用。

参考文献:
李固本,Peter; B. Bitterman 1990.“支气管肺泡灌洗液白蛋白含量的ELISA测定《湖南医科大学学报》第3


方法二

BALF样本从进行呼吸道症状常规调查的患者身上采集。对样本进行离心和无菌过滤,以去除细胞碎片和结核分枝杆菌


参考文献:
Singh, S., G. Maniakis-Grivas, U. K. Singh, R. M. Asher, F. Mauri, P. T. Elkington and J. S. Friedland (2018). "Interleukin-17 regulates matrix metalloproteinase activity in human pulmonary tuberculosis." J Pathol 244(3): 311-322.

 

处理样本的过程就是收集目标蛋白的过程,由于蛋白容易变性,降解,故该过程应尽量温和。样本处理之后的储存也非常重要,尤其注意不要反复冻融,样本处理之后可分装密封保存,4 度保存应小于 1 周,-20 度不应超过 1 个月,-80 度不应超过 2 个月。在标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。样本的处理是实验成功的第一步, 以上就是关于 Elisa 特殊样本处理方法的简述,供研究者参考。

 

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