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ELISA不常见样本的处理方法—脑脊液
人阅读 发布时间：2020-08-25 22:22
脑脊液的研究文献中，很多对如何取脑脊液没有详细描述。可能是因为属于行业常规操作，不必赘述。可对于新学者，往往很是疑惑。我们百度了一下，结果如下，仅供参考：
人脑脊液的抽取：临床上都用的是腰椎穿刺术。具体的方法是将患者左侧卧位，屈颈、屈髋、屈膝，取腰3、4为穿刺点，经过常规的消毒铺巾以后，在腰3、4的位置局部浸润麻醉，将腰穿针插入，当腰穿针进入蛛网膜下腔以后，把腰穿针中间的针芯抽出，即可流出澄清或者是有颜色、有病变的脑脊液。但是在抽取脑脊液之前需要测量脑脊液的压力，然后再留取脑脊液，脑脊液留取的过程中要注意速度要缓慢，并且量要根据颅内压的状况进行具体的调节，不宜过多也不宜过少。样本收集后于 1000g 离心 20 分钟，离心后收集上清，并将标本保存于-20度，且应避免反复冻融。
大小鼠的脑脊液量都不多，尤其是小鼠的，通常只能有几微升。我们实验室的做法是用一根胰岛素注射器前面再连接一根比较细的透明管子，管子的另一端与折下的胰岛素注射器针头连接。准备好工具，深麻老鼠后，我们只需要找到老鼠的枕骨大孔，让针头垂直于枕骨的角度插入枕骨大孔。不要插入太深，当手指有破空感的时候就停止，然后用胰岛素注射器缓慢回抽（由于大小鼠的脑脊液很少，回抽的力度应很小，速度不应快，防止脑内压增大）。脑脊液是无色透明的液体，如果透明管子里的液体是红色的，或者谈红色的，那说明你出错了，重新再来。当大小鼠的脑脊液抽完后，你就可以在透明管子中看到清澈的脑脊液从某一段突然变红了。这个时候用止血钳夹住红色段的上缘，接着用剪刀沿剪去红色的部分。这样就可以取到没受血液污染的脑脊液了。样本收集后于 1000g 离心 20 分钟，离心后收集上清，并将标本保存于-20度，且应避免反复冻融。
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人脑脊液的抽取：临床上都用的是腰椎穿刺术。具体的方法是将患者左侧卧位，屈颈、屈髋、屈膝，取腰3、4为穿刺点，经过常规的消毒铺巾以后，在腰3、4的位置局部浸润麻醉，将腰穿针插入，当腰穿针进入蛛网膜下腔以后，把腰穿针中间的针芯抽出，即可流出澄清或者是有颜色、有病变的脑脊液。但是在抽取脑脊液之前需要测量脑脊液的压力，然后再留取脑脊液，脑脊液留取的过程中要注意速度要缓慢，并且量要根据颅内压的状况进行具体的调节，不宜过多也不宜过少。样本收集后于 1000g 离心 20 分钟，离心后收集上清，并将标本保存于-20度，且应避免反复冻融。
大小鼠的脑脊液量都不多，尤其是小鼠的，通常只能有几微升。我们实验室的做法是用一根胰岛素注射器前面再连接一根比较细的透明管子，管子的另一端与折下的胰岛素注射器针头连接。准备好工具，深麻老鼠后，我们只需要找到老鼠的枕骨大孔，让针头垂直于枕骨的角度插入枕骨大孔。不要插入太深，当手指有破空感的时候就停止，然后用胰岛素注射器缓慢回抽（由于大小鼠的脑脊液很少，回抽的力度应很小，速度不应快，防止脑内压增大）。脑脊液是无色透明的液体，如果透明管子里的液体是红色的，或者谈红色的，那说明你出错了，重新再来。当大小鼠的脑脊液抽完后，你就可以在透明管子中看到清澈的脑脊液从某一段突然变红了。这个时候用止血钳夹住红色段的上缘，接着用剪刀沿剪去红色的部分。这样就可以取到没受血液污染的脑脊液了。样本收集后于 1000g 离心 20 分钟，离心后收集上清，并将标本保存于-20度，且应避免反复冻融。
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