细胞周期检测原理归纳

细胞周期是指从一次细胞分裂形成子细胞开始到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程，可反映细胞增殖的速度。

细胞周期由多个阶段组成，通常包括G1期（细胞大小增加）、S期（DNA合成和复制 ）、G2期（细胞进一步生长），以及M期（有丝分裂和细胞分裂）、GO期（细胞静息休眠）。

在细胞周期的不同时期，细胞核内的DNA含量存在差异。使用染料对DNA进行染色（如PI染料），可根据其荧光强度判断细胞所处时期——DNA含量多，荧光强度高，DNA含量少，荧光强度低。
 

 

活细胞同样可以直接检测细胞周期

检测过程中，常遇见可以当天检测的活细胞样本，以及当天无法检测的活细胞样本，联科自主研发的细胞周期检测产品就派上大用处了，既能检测活细胞又能检测固定细胞。

铛铛铛，如下表：

货号	名称	规格	用途
70-CCS01	Cell cycle staining buffer	50mL/50T	一步法活细胞周期检测
70-CCS012	Cell cycle staining Kit	50T	活细胞/固定细胞周期检测

检测步骤小编已为大家整理好，如下图：

 

流式细胞周期检测中有许多需要注意的事项，来看

①制备单细胞悬液：操作应轻柔，减少碎片，但消化要充分而不过度，保证细胞不粘连、不破裂，染色要充分；
②最低速度上机检测：降低CV，避免仪器把相邻细胞当做一个细胞；
③排除粘连体：避免细胞粘黏检测的DNA含量为非2倍体，导致实验结果不准确;
④PI的坐标选线性：线性更能体现DNA含量的倍数关系；

⑤利用RNase消除细胞周期检测中RNA的影响：PI是一种插入性核酸荧光染料，能选择性地嵌入核酸DNA双链螺旋的碱基之间并发出荧光，但也可以插RNA的双链区，非 DNA特异性，需加入RNase消除RNA的影响；
⑥进行DNA染色时不要洗涤：不同于蛋白质染料和细胞之间的牢固结合，DNA与染料的结合，是一种结合态与游离态之间松散的平衡，洗涤步骤会造成染料丢失，降低核酸的特异性荧光，造成测量值降低；
⑦实验放最后做：由于PI具有黏性，通常周期实验放在最后做，否则需要深度清洗后，再进行其他实验；

 

一图看懂细胞周期的结果分析

 

 

G0/G1期：第一个峰。G1期是DNA含量最少的时期，DNA复制还没有开始；G0期是细胞静止期，不复制DNA，因此图上无法与G1期分开；

S期：显示为第二个不高但很宽的峰。此时期细胞开始复制到完成复制，是一个一倍DNA到二倍DNA的过程；

G2/M期：第三个峰。G2期是DNA复制完成至分裂的一段时间，此时细胞内含二倍DNA；M期是细胞分裂的过程，此时细胞内是二倍DNA。

 

细胞周期检测在肿瘤中的应用

在肿瘤病理学研究中，通常以S期细胞比率作为判断肿瘤增殖状态的指标；

在肿瘤治疗中，G0期细胞对化疗不敏感，因而可通过调控机理的研究，诱发G0期癌细胞进入细胞周期，再合理用抗癌药物加以杀灭，是防止癌转移和扩散的重要调控措施；

细胞周期失调是癌症的主要特征之一，对细胞周期调控的研究，有助于阐明肿瘤的发生以及终末细胞的分化,将为治疗肿瘤和诱导终末分化细胞的增殖提供有益的思路。

鉴于以上应用，衍射需要用到周期检测试剂盒的客户广泛：

①肿瘤治疗研究者（免疫疗法、细胞疗法、细菌治疗、化疗放疗联合疗法）
②肿瘤药物研发者（CAR-T/CAR-NK/ADC肿瘤药）
③中药研究者
④基因功能、基因调控研究者
⑤感染科、免疫科、发育生物学研究者

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