不知不觉虎年已经走过一周了，相信各位小伙伴都度过了一个幸福愉快的春节。无论是已经回归工作或学习，还是依旧在享受着假期，你都可以空出三分钟来学习一些小知识。今天为大家分享细胞周期检测的相关知识。

细胞周期检测的原理
从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个细胞周期，通常由G0/G1期、S期、G2期和M期组成。在细胞周期的不同时期，细胞核内的DNA含量存在差异。使用染料对DNA进行染色（如PI染料），DNA含量多，荧光强度高，DNA含量少，荧光强度低。因此根据DNA荧光强度的不同，即可判断细胞处于哪个时期。
 

利用RNase消除细胞周期检测中RNA的影响
PI是通过插入双螺旋结构中叠加在一起的碱基对核酸进行染色的，并且它可以插入所有DNA和RNA的双链区，PI不是DNA特异性的，所以需要加入RNase消除RNA的影响。

进行DNA染色时不要洗涤

不同于蛋白质染料和细胞之间的牢固结合，DNA与染料的结合，是一种结合态与游离态之间松散的平衡，不是很牢固，所以洗涤步骤会造成染料丢失，降低核酸的特异性荧光，造成测量值降低。因此，DNA染色时一定不要洗涤。

固定细胞和活细胞的细胞周期检测

PI、7-AAD、TOTO-3和YOYO-1等染料不能透过完整的细胞膜，在染色时，一般需要用70%乙醇固定、通透细胞膜，从而使这些染料进入细胞核内与DNA结合。因此，细胞周期检测通常需要预先对细胞进行固定。

如果想要检测活细胞样本，可以选择联科生物的细胞周期检测试剂盒，不仅可以检测固定细胞，也可以检测活细胞。
 

名称	Cell cycle staining Kit
货号	70-CCS012
试剂组成	DNA   staining solutionPermeabilization   solution
规格	50T

 

其他应该注意的问题：

● 仪器：定期清洗喷嘴，激光预热时间充分，低流速进样等。

● 样本：消化要充分，但不能过度，保证细胞不粘连、不破裂，染色要充分等。