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真?假?ELISA试剂盒选择要小心—购买后

人阅读 发布时间:2020-09-22 13:53



 
后 
1. 检查
    检查说明书、包装盒的质量,通常假冒伪劣产品为了降低成本,印刷的质量会比较差。其次仔细阅读说明书,如上所示查找ELISA的性能指标。

2. 实验
   1.用干扰实验即可鉴别ELISA试剂盒是否检测目的抗原

从别的公司另外买一支该试剂盒的标准品蛋白,将该标准品蛋白和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液;37℃孵育15分钟后,代替检测抗体;
按照试剂盒说明书进行标准曲线制作,不过以混合孵育液替代检测抗体。
实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的另外购买的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检测抗体针对的不是其标明的检测因子,该试剂盒为假货ELISA试剂盒;
如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体能与另外购置的标准品蛋白互作,从而已被抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒的检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。
 
 
2.如果购买了同一公司的两盒ELISA试剂盒AB,利用交叉实验即可鉴别ELISA试剂盒是否造假(适用于试剂盒标注指标名称不同,实则都是同一指标的情况)

取出购买的试剂盒A的包被板两条;
一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线;
另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线;
后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物;
实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非AB,即该试剂盒为假货ELISA试剂盒;
如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。
 

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精密度对比:
 


加标回收率对比:


灵敏度对比:


独特优势:
样本量要求少,人需 50 uL,大/小鼠仅需 20 uL
操作时间短,最快 2小时就可以完成孵育;
选用NIBSC国际标准品进行校准 ;
酶标板内CV 5% 左右,板间7%
加标回收率范围控制在80%~120%
 


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