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杭州联科生物技术股份有限公司
入驻年限：13 年
- 联系人：
李先生
- 所在地区：
浙江 杭州市 萧山区
- 业务范围：
抗体、细胞库 / 细胞培养、实验室仪器 / 设备、医疗器械、体外诊断
- 经营模式：
代理商 生产厂商 科研机构 医院药店
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技术资料/正文
ELISA通关必备丨结果篇丨白板与花板
127 人阅读发布时间：2023-08-24 13:57
ELISA通关必备丨结果篇丨白板与花板
一、白板
如果显色完成后，肉眼可见整板没有显示反应，可能原因及应对方法是什么呢？小科整理了可能的原因，希望对您有帮助。
| 序号 | 可能原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| 1 | 试剂盒储存不当；不同试剂盒试剂混用 | 购买新的试剂盒，注意储存条件；不可混用 |
| 2 | 孵育温度低，时间短 | 如果温度偏低，则延长孵育时间和显色时间 |
| 3 | 错加、漏加试剂 | 严格按照说明书步骤添加正确试剂 |
| 4 | 用于配置溶液的容器不干净，或水有问题 | 使用干净容器以及合格的蒸馏水 |
| 5 | 检测抗体和/或HRP浓度太低 | 参照说明书，不可随意稀释 |
| 6 | 试剂温度不均一 | 所有试剂要室温平衡 30 min |
| 7 | 洗板过程中浸泡时间长，洗板次数太多，洗板冲击力大 | 严格按说明书操作 |
二、花板
花板是指空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常，而标本孔的吸光度（OD 值）却明显偏高，可能原因及应对方法详见下表。
| 序号 | 可能原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| 1 | 洗涤次数少，不充分 | 按说明书要求洗涤 |
| 2 | 底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB ）被金属离子或氧化剂污染或曝光 | 配置时使用干净容器以及合格蒸馏水；避光保存 |
| 3 | 孵育温度高和/或时间过长 | 控制孵育和最后酶促反应的温度和时间 |
| 4 | 加样时未更换枪头，造成交叉污染 | 每个样都更换枪头 |
| 5 | 附近孔交叉污染 | 洗涤时，洗液不可溢出孔洞，垂直拍板；使用合适的拍板纸，避免孔内进入纸屑尘渣；孵育时封板要严密，防止阳性标本的液体蒸发 |
| 6 | 样本存在内源性干扰物质 | 推测可能的感染物质，并进行对应处理 |
| 7 | 样本溶血、贮存过久、凝集不全、被细菌污染、采血管中添加物影响等 | 避免溶血、污染、过久储存等现象 |
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